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使用STORM顯微鏡和用于SMLM成像的新型熒光探針繪制神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的分子圖譜

由Cytoshelle股份有限公司-直播細(xì)胞新聞2024年4月18日

使用STORM顯微鏡和用于SMLM成像的新型熒光探針繪制神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的分子圖譜

隨著科學(xué)家們尋求有效分析突觸及其相關(guān)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，對能夠?qū)ι窠?jīng)元結(jié)構(gòu)進(jìn)行精確成像的工具和方法的需求很大。最近，Danglot小組報(bào)告了一種與膜標(biāo)記探針相結(jié)合的新軟件，用于檢測突觸前和突觸后蛋白質(zhì)。統(tǒng)計(jì)對象距離分析（SODA）軟件有效地分析了細(xì)胞形狀和斑點(diǎn)密度，并能夠檢測兩種突觸相關(guān)蛋白突觸蛋白和PSD95之間的距離。重要的是，SODA軟件甚至被用于進(jìn)行3D分析，使其適用于厚3D體積STORM圖像。該軟件的主要限制是需要正確識別細(xì)胞邊界；因此，該小組將SODA與名為Membright的熒光膜探針結(jié)合使用。該小組強(qiáng)調(diào)了該探針的幾個(gè)重要特征，這些特征使其成為活細(xì)胞和固定細(xì)胞標(biāo)記的優(yōu)秀工具，甚至強(qiáng)調(diào)了使用該工具優(yōu)化膜標(biāo)記的重要條件和因素。他們描述了membright探針的具體用途，包括細(xì)胞外囊泡標(biāo)記，以及在將探針用于該應(yīng)用時(shí)需要考慮的要點(diǎn)。最后，討論了探針在單分子定位顯微鏡中的應(yīng)用信息。總的來說，他們已經(jīng)確定了一個(gè)很好的工具組合，可以研究可用于神經(jīng)元細(xì)胞和其他細(xì)胞模型的蛋白質(zhì)納米分子圖譜。Cytoshelle股份有限公司的MemGlow™590（分類號MG03）是Cy3.5-Mem亮探針，在這些研究中都得到了強(qiáng)調(diào)。

Myo19的缺失通過增強(qiáng)微環(huán)境ROS梯度和趨化性增加轉(zhuǎn)移

細(xì)胞骨架股份有限公司-小G蛋白新聞2024年5月14日

Myo19的缺失通過增強(qiáng)微環(huán)境ROS梯度和趨化性增加轉(zhuǎn)移

細(xì)胞代謝紊亂、活性氧（ROS）升高和嵴完整性喪失都與腫瘤進(jìn)展有關(guān)，在某些情況下還會(huì)增強(qiáng)轉(zhuǎn)移。Ren等人確定線粒體定位的肌動(dòng)蛋白運(yùn)動(dòng)Myosin 19（Myo19）是球狀癌癥模型中ROS水平的重要調(diào)節(jié)因子。該小組對乳腺癌樣本進(jìn)行了初步的免疫組織化學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)這些患者樣本中Myo19水平低與轉(zhuǎn)移率高之間存在相關(guān)性。利用小鼠模型，該小組得出了支持性結(jié)果，即敲低Myo19導(dǎo)致更高的腫瘤侵襲性。然后，該小組轉(zhuǎn)向球體模型來評估Myo19在癌癥侵襲中的作用機(jī)制。這些研究證實(shí)，Myo19的缺失導(dǎo)致ROS水平升高；有趣的是，ROS水平在整個(gè)球體中的分布并不均勻，而是在外殼中較高，而在中間層保持較低。進(jìn)行活細(xì)胞成像以分析細(xì)胞對ROS梯度的侵襲性，他們發(fā)現(xiàn)通過在野生型細(xì)胞上分層Myo19 KO細(xì)胞來產(chǎn)生ROS梯度促進(jìn)了球狀癌癥細(xì)胞的侵襲。在Boyden室系統(tǒng)中用H2O2梯度復(fù)制腫瘤細(xì)胞的這種趨化機(jī)制，從而進(jìn)一步證明其對癌癥細(xì)胞侵襲的重要性。最后，該小組確定Src是這些癌癥細(xì)胞中的關(guān)鍵氧化還原傳感器，并表明抑制Src激活減弱了H2O2的趨化性。此外，他們表明Src活化導(dǎo)致RhoA抑制，并且用RhoA抑制劑處理足以消除H2O2的趨化性?？傊?，該小組確定了將嵴功能障礙的潛力與ROS梯度增強(qiáng)和促進(jìn)腫瘤侵襲聯(lián)系起來的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。Cytoshelle股份有限公司的RhoA激活劑（Cat.#CN03）和RhoA Pull-down激活測定（Cat.#BK036）是研究RhoA在這些研究中的作用的關(guān)鍵工具。

將其結(jié)合在一起：運(yùn)動(dòng)蛋白在自噬中的重要作用

由Cytoshelle股份有限公司-Tubulin新聞2024年5月2日

介紹

自噬是一個(gè)重要的分解代謝過程，在這個(gè)過程中，受損的細(xì)胞器和其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)被靶向降解和回收其組成成分。它對質(zhì)量控制和細(xì)胞穩(wěn)態(tài)很重要，但也有其他公的作用，如分化和發(fā)育。1,2自噬被廣泛稱為“自噬"現(xiàn)象，不是一種單一的途徑，而是在復(fù)雜的調(diào)控下實(shí)際上包括三種相關(guān)機(jī)制3：大自噬（本通訊的主題）、伴侶介導(dǎo)的自噬（特定蛋白質(zhì)被引導(dǎo)到溶酶體進(jìn)行降解）和微自噬，其中細(xì)胞物質(zhì)被晚期內(nèi)體或溶酶體的膜內(nèi)陷直接隔離。1

大自噬，以下稱為自噬，如圖1所示，可能是一種非選擇性的整體過程，也可能是通過特定的自噬受體（SAR）識別特定的貨物；4例如，如線粒體自噬消除受損線粒體所示。5無論哪種方式，所選貨物都被稱為自噬體的雙膜囊泡包圍，然后該囊泡必須與溶酶體融合，以啟動(dòng)酶降解并完成自噬過程。如下文所述，融合步驟需要由細(xì)胞骨架和相關(guān)運(yùn)動(dòng)蛋白通過不斷解開的機(jī)制介導(dǎo)的協(xié)調(diào)的囊泡運(yùn)輸。6

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本通訊還包括：

-微管蛋白和微管工具

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Rhotekin RBD珠（結(jié)合活性Rho蛋白）（目錄號RT02）

化合物篩選

Cytoshelle，股份有限公司是開發(fā)微管蛋白抑制劑、微管抑制劑、肌球蛋白抑制劑和肌節(jié)抑制劑、驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑和小G蛋白抑制劑的化合物篩選服務(wù)的可靠來源。在過去的20年里，許多公司與我們簽訂了合同，為基于SAR的化合物優(yōu)化和臨床前藥物開發(fā)分析和驗(yàn)證提供早期發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)、定期數(shù)據(jù)。在所有情況下，隨著項(xiàng)目的進(jìn)展，客戶都會(huì)得到定期更新，及時(shí)完成并在綜合報(bào)告中記錄完整的項(xiàng)目細(xì)節(jié)。我們的專家可以在細(xì)胞骨架和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)領(lǐng)域提供深入的知識和建議，適用于基于SAR的研究和一次和二次篩選。靶蛋白具有快速可用的測定法，包括GEFs（Dbs、LARG、Ras-GRF、SOS1、Tiam1、Vav1、Vav2）、驅(qū)動(dòng)蛋白（Eg5、KIF5、KIF1C、KIFC1、KIF、KIF3C、KIFC 3、MKLP1、MKLP2、MCAK、CenPE、色動(dòng)蛋白）、肌球蛋白（肌球蛋白S1、重肌松蛋白、鈣敏感性可溶性肌體atp酶）、小g蛋白（N-Ras、H-Ras、K-Ras、R-Ras、RhoA、RhoB、RhoC、Rac1、Rac2、Rac3、Cdc42、Arf1、Arf6 6），微管蛋白靶點(diǎn)如神經(jīng)元微管蛋白、微管和物種特異性FtsZ蛋白，以及特殊的微管蛋白，如癌癥細(xì)胞系或腫瘤微管蛋白、植物微管蛋白和真菌微管蛋白。

我們在分析中引入了模塊化格式，可以更容易地識別每種格式是否適合您的項(xiàng)目。現(xiàn)成的模塊概述如下。單擊上面的“關(guān)于"選項(xiàng)卡可以獲得更多詳細(xì)信息。

單擊下面的鏈接查看完整的分析范圍：

Cytoskeley在保密的基礎(chǔ)上提供定制服務(wù)，因此對我們工作的公開引用有限。來自我們服務(wù)的出版物的代表性例子是1）微管蛋白聚合測定（參考文獻(xiàn)1）和植物微管蛋白純化（參考文獻(xiàn)2）。我們還可以根據(jù)要求提供所提供服務(wù)的專業(yè)參考資料。

微管和運(yùn)動(dòng)蛋白如何實(shí)現(xiàn)纖毛的維持和功能

由Cytoshelle股份有限公司-Tubulin新聞2024年4月4日

介紹

纖毛是高度保守的、基于微管的細(xì)胞器，存在于絕大多數(shù)人類細(xì)胞上。1這兩種主要類型是原發(fā)纖毛，也稱為感覺或非運(yùn)動(dòng)纖毛和運(yùn)動(dòng)纖毛（圖1a）。大多數(shù)細(xì)胞都有一個(gè)單一的初級纖毛2，具有感覺和信號功能，而活動(dòng)纖毛是特化的多纖毛細(xì)胞的一個(gè)特殊特征，并以協(xié)調(diào)的方式搏動(dòng)以驅(qū)動(dòng)細(xì)胞外液體流動(dòng)。1,3纖毛搏動(dòng)可使呼吸道上皮清除粘液，使腦脊液通過室管膜循環(huán)，并使卵子在輸卵管中運(yùn)輸。4

無論類型如何，所有纖毛都通過一種稱為基體的改良中心極結(jié)構(gòu)錨定在細(xì)胞內(nèi)。4細(xì)胞外突起被稱為軸突5，由九個(gè)微管雙絲組成的圓柱形束支撐（圖1b）。在活動(dòng)纖毛中，存在一個(gè)額外的中心雙聯(lián)體，合并的軸絲微管充當(dāng)其他結(jié)構(gòu)成分的支架，3，5顯著的是為纖毛搏動(dòng)提供動(dòng)力的軸絲動(dòng)力蛋白組件。6

在這篇通訊中，我們將簡要回顧關(guān)鍵纖毛運(yùn)動(dòng)蛋白的獨(dú)作用，包括驅(qū)動(dòng)蛋白-2、動(dòng)力蛋白-2和軸索動(dòng)力蛋白臂，并考慮影響其正常功能的突變的病理后果。7

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