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Dshb 12C5 Dshb產(chǎn)品研究報告 Dshb產(chǎn)品研究報告
目錄領(lǐng)域抗原: 多功能蛋白聚糖(透明質(zhì)酸結(jié)合區(qū)域)供盈利: YesAntigen 物種: 人類雜交瘤細(xì)胞可用(非盈利) : NoIsotype: MIgG1儲存者: Asher，R.A。宿主物種: 小鼠抗原序列: 保守序列在 N 端的 g1結(jié)構(gòu)域陽性測試物種反應(yīng)性: 牛，犬，人，豬，大鼠存款機(jī)構(gòu): 劍橋大腦修復(fù)中心抗原分子量: 明顯: > 250kD 保存人注釋: 印跡: 是的，但對還原物種敏感反應(yīng)性: 人類蛋白質(zhì)圖譜: 多功能蛋白聚糖(aka _ GHAP _)基因的免疫原: 透明質(zhì)酸結(jié)合區(qū)基因: VCANAlternate 抗體名稱: 替代基因名稱: WGN; ERVR; GHAP; PG-M; WGN1;CSPG2替代抗原名稱: 克隆性: 單克隆骨髓瘤菌株: NS-1表位定位: YesUniprot ID: P13611表位位置或序列: G1 domainEnterz 基因 ID: 1462免疫原序列: 與抗原序列相同?？贵w注冊表 ID: AB _ 528503其他角色塑造: 推薦用途: ELISA，FFPE，功能阻斷，免疫熒光，免疫組織化學(xué)，免疫沉淀法，微陣列，蛋白質(zhì)印跡
所有細(xì)胞產(chǎn)品都含有抗菌劑 ProClin。點(diǎn)擊這里獲取更多信息。這些雜交瘤是你的同事創(chuàng)造的。請確認(rèn)雜交瘤貢獻(xiàn)者和雜交瘤發(fā)展研究庫(DSHB)在您的出版物的材料和方法。請把電郵給我們。材料和方法部分: 12C5是由 Asher，R.A。(DSHB 雜交瘤產(chǎn)品12C5)儲存和處理建議雖然許多細(xì)胞產(chǎn)品保持在4攝氏度多年沒有活性損失，4攝氏度的貨架壽命是高度可變的。對于即時使用，建議短期貯存在攝氏4度長達(dá)兩周。對于長期儲存，將溶液分成不小于20ul 的體積，在 -20 °C 或 -80 °C 冷凍。體積小的試樣應(yīng)能提供足夠的試劑供短期使用。應(yīng)避免凍融循環(huán)。對于濃縮物或生物反應(yīng)器產(chǎn)品，可在冷凍前加入等體積的低溫保護(hù)劑甘油。最佳的免疫球蛋白濃度因物種和抗體親和力的不同而不同。對于每種產(chǎn)品，最終用戶實(shí)驗(yàn)室必須針對每種應(yīng)用優(yōu)化抗體效價。使用小鼠免疫球蛋白時，免疫組織化學(xué)(IHC)、免疫熒光(IF)和免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)的良好起始濃度為2-5微克/毫升。對于蛋白質(zhì)印跡，小鼠 Ig 的推薦濃度范圍為0.2 -0.5 ug/ml。一般來說，兔抗體表現(xiàn)出更大的親和力，并且在初始測試中以較低的免疫球蛋白濃度使用。兔免疫球蛋白的推薦濃度為0.2 -0.5 ug/ml (IF，IHC 和 ICC)和20.50 ng/ml (WB)。
彈性纖維介導(dǎo)的中耳麻醉。藤宮解剖學(xué)雜志221.4(2012年10月) : 331.40。肌球蛋白異構(gòu)體在個體發(fā)育中肌纖維肌原纖維間的差異分布。細(xì)胞生物學(xué)雜志110.3(1990年3月) : 693-701。蛋白多糖核心蛋白在成人視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜中的差異分布。主教 PN 眼科與視覺科學(xué)研究53.12(2012年11月7日) : 7528-38。人腦中一種大聚集蛋白多糖的分離。生物化學(xué)雜志267.33(1992年11月25日) : 23883-7。在脊髓瘢痕組織急性至慢性成熟期間 NG2，神經(jīng)聚糖，磷酸三聚糖，短肽聚糖，多功能蛋白聚糖 V2和腱生蛋白 -C 的分布，細(xì)胞關(guān)聯(lián)和蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化。神經(jīng)科學(xué)研究雜志71.3(2003年2月1日) : 427-44。Versican 在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷中表達(dá)上調(diào)，是少突膠質(zhì)細(xì)胞系細(xì)胞的產(chǎn)物。神經(jīng)科學(xué)雜志: 神經(jīng)科學(xué)學(xué)會雜志22.6(2002年3月15日) : 2225-36。Versican 對上皮性卵巢癌細(xì)胞及其球體轉(zhuǎn)移的影響。卵巢研究雜志7。(2014) : 70.關(guān)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中軟骨樣蛋白多糖和連接蛋白的存在。Bignami AGlia 13.4(1995年4月) : 294-308。
人類中耳的彈性纖維介導(dǎo)的生成 Tetsuaki Kawase 1，Shunichi Shibata，Yukio Katori，Aiji Ohtsuka，Gen Murakami，Mineko FujimiyaAffiliations 擴(kuò)展 PMID: 22803514 PMCID: PMC3458252 DOI: 10.1111/j. 1469-7580.2012.01542。對恒定振動(聲振蕩)的適應(yīng)可能在耳小骨的骨-肌腱和骨-韌帶界面賦予特定的形態(tài)，因此代表了激動人心的研究目標(biāo)。我們在組織學(xué)上檢查了(i)鼓膜張肌和鐙骨肌的骨附著物，以及(ii)從七具捐贈的老年尸體上取得的砧骨鐙骨關(guān)節(jié)的環(huán)狀韌帶。值得注意的是，醛-品紅染色和彈性-馬松染色均表明，成纖維的主要纖維成分不是膠原纖維，而是成熟的彈性纖維。彈性纖維染色陽性對照為顳骨材料中的動脈壁彈性層。彈性纖維深入 II 型膠原缺乏的纖維軟骨，覆蓋耳小骨。肌腱由外層薄的膠原纖維和靠近錘骨或鐙骨的內(nèi)層厚的彈性纖維組成。在特的彈性纖維介導(dǎo)的結(jié)構(gòu)中，透明質(zhì)酸、多功能蛋白聚糖和纖維連接蛋白沿著彈性纖維強(qiáng)烈表達(dá)。透明質(zhì)酸似乎起到了減少彈性纖維摩擦的潤滑劑的作用。聚集蛋白聚糖被強(qiáng)烈標(biāo)記在富含彈性纖維的韌帶內(nèi)側(cè)的盤狀或皺襞狀纖維團(tuán)塊中，可能是由于韌帶的壓縮應(yīng)力。Tenascin-c 在附件中不明顯。在持續(xù)振動的環(huán)境中，彈性纖維介導(dǎo)的末端似乎能抵抗組織破壞。形態(tài)學(xué)不太可能是年齡相關(guān)性變性的結(jié)果。2012年《解剖學(xué)雜志》2012年《解剖學(xué)會》。
肌球蛋白同種型在個體發(fā)育中的肌纖維肌原纖維中的差異分布 G F Gauthier 1Affiliations expandPMID: 2307704 PMCID: PMC2116049 DOI: 10.1083/jcb.110.3.693游離 PMC 文章 AbstractMyosin 使用同種型特異性單克隆抗體原位定位于雞胸肌中。免疫熒光和免疫金電鏡顯示肌原纖維的分布。熒光素或羅丹明標(biāo)記的抗體(12C5)特異性的頭部區(qū)域(S1)的肌球蛋白被用作一個標(biāo)記鑒定“胚胎"肌球蛋白。在縱向半薄冰凍切片中，少數(shù)肌原纖維強(qiáng)烈染色12C5。同一細(xì)胞內(nèi)其他肌原纖維染色均較弱。類似地，在為 EM 制備的 Lowicryl 包埋的超薄切片中，少數(shù)種群優(yōu)先與金標(biāo)記的12C5反應(yīng)。一種針對“新生兒"肌球蛋白棒部分的特異性抗體(5B4)與幾乎所有的肌原纖維都有強(qiáng)烈的反應(yīng)，這在光學(xué)和電子顯微鏡下是明顯的。少數(shù)與12C5反應(yīng)強(qiáng)烈的纖維與5B4反應(yīng)弱。這些觀察結(jié)果表明，與12C5反應(yīng)的表位在一些肌原纖維中比在同一細(xì)胞內(nèi)的其他肌原纖維中更豐富。三類肌原纖維可以通過它們在胚胎和新生兒肌球蛋白形式中的相對比例來鑒定: 在幾乎所有的原纖維中，新生兒同種型占主導(dǎo)地位; 在少數(shù)人群中，胚胎和新生兒同種型都是豐富的; 在少數(shù)原纖維中，胚胎同種型占主導(dǎo)地位。結(jié)果表明，有不同的肌原纖維群體，其中特定的同種型是分離在一個單獨(dú)的細(xì)胞。
兩種快速肌肉肌球蛋白模式的發(fā)育轉(zhuǎn)變
采用免疫熒光原位觀察發(fā)育中的雞胸肌和背闊肌兩塊快肌肌球蛋白模式的轉(zhuǎn)變。使用針對胸肌肌球蛋白重鏈的階段特異性單克隆抗體定位肌球蛋白同種型。兩種抗體(12C5和10H10)識別成人和晚期胚胎肌球蛋白。在10天時，它們對胸肌和后背闊肌的反應(yīng)較弱，但在18天時反應(yīng)強(qiáng)烈。兩塊肌肉對成人特異性抗體(5C3)全不反應(yīng)，表明18天時用12C5和10H10染色反映了胚胎肌球蛋白。因此，兩種不同的胚胎同種型在每塊肌肉中依次表達(dá)。12C5和10H10在孵化后再次對這些肌肉作出虛弱的反應(yīng)。在胸肌28天和背闊肌后60天后，對兩種抗體的強(qiáng)陽性反應(yīng)的再現(xiàn)與對成人特異性抗體5C3的反應(yīng)的次出現(xiàn)良好相關(guān)，表明成人模式的開始。在蛋中18天和孵化后60天之間，兩塊肌肉都對特異于“新生兒"肌球蛋白的抗體(5B4)產(chǎn)生強(qiáng)烈反應(yīng)。在胸大肌中，大多數(shù)纖維中的胚胎在孵化后14天被新生肌球蛋白取代; 到28天，成人和新生肌球蛋白在大多數(shù)纖維中都表達(dá); 在成人中，新生肌球蛋白全被成人同種型取代。相比之下，背闊肌后部的許多纖維在孵化后至少60天仍然表達(dá)胚胎和新生兒肌球蛋白，其余的纖維表達(dá)新生兒同種型; 新生兒同種型存在于一些纖維中，甚至在成年背闊肌后部。因此，我們在兩種不同的快速肌肉中原位展示了四種不同的重鏈同種型。“早期胚胎"、“晚期胚胎"、“新生兒"以及最終的“成年"異構(gòu)體在每塊肌肉中都有表達(dá)，并且不止一種異構(gòu)體常常共存于同一纖維中。
蛋白多糖核心蛋白在成人視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜中的差異分布
摘要目的: 研究蛋白多糖(PG)核心蛋白在成人視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜中的存在和分布。方法: 將尸體眼組織解剖成 Bruch 膜/脈絡(luò)膜復(fù)合體，分離 Bruch 膜或神經(jīng)感覺視網(wǎng)膜。用陰離子交換色譜法提取 PGs，并進(jìn)行部分純化。通過串聯(lián)質(zhì)譜法和通過數(shù)據(jù)庫搜索鑒定的 PG 核心蛋白分析蛋白酶化肽。在人類黃斑組織切片上用免疫熒光顯微鏡檢查前列腺素的分布情況。結(jié)果: 在人類視網(wǎng)膜中發(fā)現(xiàn)了基底膜聚糖 perlecan，agrin 和膠原 -XVIII，并且存在于內(nèi)界膜，血管壁和 Bruch’s 膜中。透明質(zhì)酸多糖和聚集蛋白聚糖也被檢測到。在 Bruch 膜中發(fā)現(xiàn)了 Versican，而聚集蛋白聚糖分布在整個視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜。軟骨連接蛋白 HAPLN1在感光間質(zhì)和鞏膜中含量豐富，而 HAPLN4(腦連接蛋白2)則遍布視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜。小富氨酸重復(fù) PG (SLRP)家族成員雙糖鏈蛋白聚糖、核心蛋白聚糖、纖維調(diào)節(jié)蛋白、盧米肯、米美肯、黃醇和普羅拉金存在，在視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜中有不同的分布模式。結(jié)論: 蛋白質(zhì)組學(xué)和免疫組織化學(xué)分析方法的結(jié)合次全面分析了 PG 核心蛋白在人類視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜中的存在和分布。這補(bǔ)充了我們對人眼中糖胺聚糖鏈分布的認(rèn)識，對于理解眼睛在健康和疾病中的結(jié)構(gòu)和功能調(diào)節(jié)具有重要意義。
人腦中一種大聚集蛋白多糖的分離
摘要從人腦中分離出一個大的蛋白多糖(365kDa) ，經(jīng)過抗軟骨素單克隆抗體鑒定。分離需要陰離子交換層析，然后通過 Sephacryl S-500柱進(jìn)行凝膠過濾。蛋白多糖與[3H ]透明質(zhì)酸(HA)特異性結(jié)合。高鹽濃度(高達(dá)4M)不會降低結(jié)合力，而在低 pH (< 4.0)時則會抑制結(jié)合力。HA 的八聚體和十聚體(而不是六聚體)低聚糖抑制了結(jié)合。蛋白多糖的有限蛋白水解產(chǎn)生了一個相對穩(wěn)定的多肽(80kDa)。該80-kDa 多肽的氨基末端序列與人成纖維細(xì)胞蛋白多糖 versican 的 cDNA 衍生的氨基末端序列相同。一個針對牛蛋白多糖的單克隆抗體通過免疫印跡技術(shù)與從人腦中分離出的蛋白多糖進(jìn)行反應(yīng)，從而識別出多功能核心蛋白。用該抗體對牛脊髓丙酮固定冷凍切片中的蛋白多糖進(jìn)行定位。蛋白多糖在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的定位與先前報道的膠質(zhì)透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(GHAP)相同，后者是腦細(xì)胞外間質(zhì)(ECM)的一種60千達(dá)糖蛋白。然而，在兩種抗原對透明質(zhì)酸酶的敏感性方面觀察到一個主要的差異。如先前報道的，GHAP 通過透明質(zhì)酸酶消化從組織中釋放，而蛋白多糖在這些條件下持續(xù)存在。我們得出結(jié)論，腦 ECM 中的蛋白質(zhì)-透明質(zhì)酸聚集體含有 GHAP 和多功能蛋白聚糖，GHAP 僅通過與透明質(zhì)酸的相互作用保留在 ECM 中，并且蛋白多糖以其他方式錨定，并且可能連接細(xì)胞表面與 ECM，因?yàn)樗皇峭ㄟ^透明質(zhì)酸酶消化釋放的。
在脊髓瘢痕組織急性至慢性成熟期間 NG2，神經(jīng)聚糖，磷酸三聚糖，短肽聚糖，多功能蛋白聚糖 V2和腱生蛋白 -C 的分布，細(xì)胞關(guān)聯(lián)和蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化
先前的研究已經(jīng)將嵴髓損傷后軸突再生的失敗與軸突接觸富含軟骨素蛋白聚糖的瘢痕組織聯(lián)系起來(CSPGs; Davies 等，1999)。在本研究中，我們在損傷后24小時至6個月的時間點(diǎn)對成年大鼠脊髓刺傷內(nèi)的5個軸突生長抑制性 CSPG 和腱生蛋白 -C 進(jìn)行了免疫組織化學(xué)和定量 Western 印跡分析。定量蛋白質(zhì)印跡分析顯示，24小時后神經(jīng)多糖、腱生蛋白 C 和 NG2水平強(qiáng)勁增加，提示這些分子在防止急性形成瘢痕組織的軸突再生中發(fā)揮作用。在8天時達(dá)到245/130kD 神經(jīng)多糖，NG2和250/200kD 腱生成素 -C 的峰值水平，在損傷后1個月達(dá)到磷酸三酯和140/80kD 短肽的最大水平。然而，Versican V2蛋白水平顯示出相反的趨勢，在所研究的所有時間點(diǎn)都低于未損傷的脊髓值。損傷后8天的共聚焦顯微鏡顯示磷酸鹽、 NG2和腱生蛋白 -C 的免疫反應(yīng)性增強(qiáng)，特別是在損傷中心的纖連蛋白(+)瘢痕組織內(nèi)。相比之下，星狀 NG2(+)細(xì)胞突起的病灶邊緣顯示神經(jīng)元，星形膠質(zhì)細(xì)胞的病灶邊緣顯示神經(jīng)元的程度要小得多。在損傷后6個月，慢性瘢痕組織中130kD 的神經(jīng)多糖、短肽和 NG2水平仍顯著高于對照組。我們的研究結(jié)果顯示了抑制性 CSPGs 和腱生蛋白 C 的新的表達(dá)模式和細(xì)胞關(guān)聯(lián)，這對急性和慢性脊髓瘢痕組織的軸突再生具有重要意義。版權(quán)所有2002年 Wiley-Liss 公司。
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