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核酸印跡工作流程核酸(脫氧核糖核酸或核糖核酸)的純化、角色塑造和鑒定往往需要在印跡應(yīng)用中對(duì)目標(biāo)進(jìn)行分析。核酸通常用凝膠電泳按大小分離，然后轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜上，用互補(bǔ)探針進(jìn)行檢測(cè)。核酸印跡應(yīng)用需要高特異性。由于目標(biāo)序列的特性，所使用的探針對(duì)提供這種特異性大有幫助，但靈敏度也取決于目標(biāo)的豐度和可用于檢測(cè)的試劑的質(zhì)量。載體實(shí)驗(yàn)室支持您的研究，提供了廣泛的試劑和工具包的核酸檢測(cè)和分析的印跡。步驟1貼標(biāo)簽標(biāo)記用物素、高辛（DIG）、DNP或熒光素等標(biāo)簽標(biāo)記核酸探針，使用一步直接方法、基于硫醇的間接標(biāo)記或特定的5'和3'末端標(biāo)記技術(shù)。標(biāo)簽的選擇取決于許多因素，包括所需的靈敏度和可用于檢測(cè)的儀器。有關(guān)更多信息，請(qǐng)觀看我們的視頻“用PHOTOPROBE物素試劑盒進(jìn)行核酸標(biāo)記"。 物素和高辛標(biāo)記試劑 ChromaLink 物素和高辛含有紫外線可追蹤的發(fā)色團(tuán)，使蛋白質(zhì)和核酸的物素化和高辛化能夠重現(xiàn)。ChromaLink 發(fā)色團(tuán)可以讓你通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)單直接的紫外線掃描來(lái)量化結(jié)合，這需要幾分鐘，而不是幾個(gè)小時(shí)。標(biāo)記定量不需要 HABA/親和素和熒光報(bào)告分析所需的標(biāo)準(zhǔn)曲線。ChromaLink 物素和高辛還含有一個(gè) PEG3間隔物，以提高溶解度，減少空間位阻和聚集的蛋白質(zhì)觀察常規(guī)試劑。ChromaLink 標(biāo)記試劑可在胺反應(yīng)性 NHS 酯中使用，ChromaLink 物素也可作為巰基反應(yīng)性馬來(lái)酰亞胺使用。QuantTag（數(shù)量標(biāo)記）™ 物素定量試劑盒BDK-2000型SKU單位尺寸價(jià)格數(shù)量BDK-2000 1套件請(qǐng)咨詢我們的經(jīng)銷商1.如何申請(qǐng)報(bào)價(jià)或批量定價(jià)？跳到圖像庫(kù)的末尾跳到圖像庫(kù)的開頭描述規(guī)格套件組件文件相關(guān)產(chǎn)品引文（18）技術(shù)信息描述QuantTag物素試劑盒（BDK-2000）旨在測(cè)定溶液中游離物素的量或附著在核酸、蛋白質(zhì)或其他大分子上的物素分子的數(shù)量。該試劑盒可用于準(zhǔn)確確定物素標(biāo)記分子過(guò)程的標(biāo)記效率。我們一起突破 TMCat。沒有。儲(chǔ)存 BDK-2000室溫儲(chǔ)存工具包。物素定量試劑盒設(shè)計(jì)用于測(cè)定溶液中游離物素的含量或附著在蛋白質(zhì)、核酸或其他大分子上的物素的數(shù)量。試劑盒試劑與游離或結(jié)合的物素發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可用分光光度計(jì)定量的有色產(chǎn)物。吸光度在可見光中測(cè)量，允許使用塑料試管或微量滴定板。分析可以使用這兩種方案中的任何一種。方案的選擇將取決于測(cè)定中使用的試管的大小。待測(cè)試的樣品(含有未知數(shù)量的物素)與試劑盒試劑以及含有已知數(shù)量的物素的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)。將已知樣品的吸光度讀數(shù)繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)試樣品的吸光度位于標(biāo)準(zhǔn)曲線上，表示物素的存在量。產(chǎn)品描述產(chǎn)品容量量標(biāo)簽試劑187.5 mlQuantTag 試劑287.5 mlQuantTag 試劑387.5 mlQuantTag 物素標(biāo)準(zhǔn)1ml: 0.5 mM 該試劑盒含有足夠的試劑以使用1ml 方案(包括每個(gè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線)進(jìn)行25次測(cè)定或使用0.1 ml 方案進(jìn)行250次測(cè)定。? 避免接觸皮膚協(xié)議可以使用兩種方案中的任一種進(jìn)行測(cè)定。選擇方案將取決于測(cè)定中使用的反應(yīng)杯的大小。1 ml含量測(cè)定：1ml分析方案適用于1ml試管。反應(yīng)可以直接在反應(yīng)杯中進(jìn)行，也可以進(jìn)行并在測(cè)量吸光度。1.按如下方法制備QuantTag工作溶液：將0.5ml每個(gè)樣品的試劑1、0.5 ml試劑2和50µl試劑3。（黃色試劑3在與試劑1和2.）所需總量為6 ml（標(biāo)準(zhǔn)品）加1 ml測(cè)試樣品的。工作溶液最多可使用八小時(shí)。2.按如下步驟制備物素標(biāo)準(zhǔn)品：添加1µl、2µl、5µl，將10µl和20µl物素標(biāo)準(zhǔn)溶液加入五個(gè)試管中的每一個(gè)。這些標(biāo)準(zhǔn)將包含0.5 nmol、1 nmol、2.5 nmol、5 nmol和10nmol物素。在第六個(gè)反應(yīng)杯中，不添加物素（這個(gè)將用于“歸零"分光光度計(jì)）。3.調(diào)整物素化分子的濃度物素的數(shù)量可能落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)?？蛇\(yùn)行兩種不同濃度或體積的試樣同時(shí)（見注釋A）4.向反應(yīng)杯中加入20µl或更少的測(cè)試樣品。最常見的緩沖液不會(huì)干擾測(cè)定（見注釋B）。然而可通過(guò)包括含有在類似溶液中的未丁基化測(cè)試分子（例如DNA或蛋白質(zhì)）作為物素化樣品。該對(duì)照品的吸光度讀數(shù)可以然后從測(cè)試樣品的吸光度讀數(shù)中減去。5.向每個(gè)反應(yīng)杯中加入1 ml QuantTag工作溶液并在室溫下孵育30分鐘。有色反應(yīng)產(chǎn)物穩(wěn)定數(shù)小時(shí)。6.測(cè)量試樣和物素標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度在535nm處。使用不含物素的標(biāo)準(zhǔn)品，將儀器7.為了測(cè)定測(cè)試樣品中物素的nmol，使用物素用標(biāo)準(zhǔn)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線X軸和Y軸上的吸光度，如圖1注釋C所示確定每個(gè)物素化分子的物素?cái)?shù)量，見注釋C規(guī)格更多信息單元尺寸1套件應(yīng)用免疫組織化學(xué)/免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光、原位雜交、印跡應(yīng)用、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)/細(xì)胞分離、糖生物學(xué)安全標(biāo)題警告：套件組件盒子里有什么？試劑1（87.5 ml）*試劑2（87.5 ml）*試劑3（8.75 ml）*物素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1ml；0.5mM）該試劑盒含有足夠的材料，可使用1ml方案進(jìn)行25次測(cè)定（包括為每一次建立標(biāo)準(zhǔn)曲線）或使用0.1ml方案進(jìn)行250次測(cè)定。*注意：避免接觸皮膚和眼睛。如果發(fā)生接觸，立即用水沖洗。協(xié)議可以使用兩種方案中的任一種進(jìn)行測(cè)定。選擇方案將取決于測(cè)定中使用的反應(yīng)杯的大小。1 ml含量測(cè)定：1ml分析方案適用于1ml試管。反應(yīng)可以直接在反應(yīng)杯中進(jìn)行，也可以進(jìn)行并在測(cè)量吸光度。1.按如下方法制備QuantTag工作溶液：將0.5ml每個(gè)樣品的試劑1、0.5 ml試劑2和50µl試劑3。（黃色試劑3在與試劑1和2.）所需總量為6 ml（標(biāo)準(zhǔn)品）加1 ml測(cè)試樣品的。工作溶液最多可使用八小時(shí)。2.按如下步驟制備物素標(biāo)準(zhǔn)品：添加1µl、2µl、5µl，將10µl和20µl物素標(biāo)準(zhǔn)溶液加入五個(gè)試管中的每一個(gè)。這些標(biāo)準(zhǔn)將包含0.5 nmol、1 nmol、2.5 nmol、5 nmol和10nmol物素。在第六個(gè)反應(yīng)杯中，不添加物素（這個(gè)將用于“歸零"分光光度計(jì)）。3.調(diào)整物素化分子的濃度物素的數(shù)量可能落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)。可運(yùn)行兩種不同濃度或體積的試樣同時(shí)（見注釋A）4.向反應(yīng)杯中加入20µl或更少的測(cè)試樣品。常見的緩沖液不會(huì)干擾測(cè)定（見注釋B）。然而可通過(guò)包括含有在類似溶液中的未丁基化測(cè)試分子（例如DNA或蛋白質(zhì)）作為物素化樣品。該對(duì)照品的吸光度讀數(shù)可以然后從測(cè)試樣品的吸光度讀數(shù)中減去。5.向每個(gè)反應(yīng)杯中加入1 ml QuantTag工作溶液并在室溫下孵育30分鐘。有色反應(yīng)產(chǎn)物穩(wěn)定數(shù)小時(shí)。6.測(cè)量試樣和物素標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度在535nm處。使用不含物素的標(biāo)準(zhǔn)品，將儀器7.為了測(cè)定測(cè)試樣品中物素的nmol，使用物素用標(biāo)準(zhǔn)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線X軸和Y軸上的吸光度，如圖1注釋C所示確定每個(gè)物素化分子的物素?cái)?shù)量，見注釋C 注A：對(duì)于大多數(shù)物素化蛋白質(zhì)，假設(shè)每種蛋白質(zhì)含有2至30 nmol物素nmol蛋白質(zhì)。通常，5–20µl 1 mg/ml物素化溶液當(dāng)使用1ml測(cè)定。對(duì)于0.1 ml的測(cè)定，通常使用0.5–5µl的1 mg/ml溶液充足的一些高濃度的物素化蛋白可能不溶于QuantTag工作溶液。如果物素化蛋白未溶解用QuantTag溶液孵育30分鐘后，重復(fù)測(cè)定具有較低的蛋白質(zhì)濃度。對(duì)于大多數(shù)物素化的DNA，假設(shè)每10-30個(gè)堿基對(duì)有一個(gè)物素，或每千堿基對(duì)33–100個(gè)物素。通常，10–20µl 1µg/µl溶液物素化DNA的含量可能在標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)當(dāng)使用1ml測(cè)定時(shí)。對(duì)于0.1 ml測(cè)定，1–5µl 1µg/µl溶液通常就足夠了。注B：發(fā)現(xiàn)以下緩沖液和化合物干擾QuantTag分析（通過(guò)添加20µl 100 mM進(jìn)行測(cè)試溶液至1ml QuantTag工作溶液）：疊氮EDTA磷酸鹽雙Tris EPPS管道雙三丙烷HEPES Tricine硼酸鹽咪唑三碳酸酯MES檸檬酸鹽MOPS注C：為了確定每個(gè)物素化分子的物素?cái)?shù)量，首先確定所測(cè)試的物素化分子的量，通過(guò)使用以下等式：A x B x 1000C=物素化分子的nmol哪里：A=加入的測(cè)試分子濃度（µg/µl）B=加入的測(cè)試分子體積（µl）C=測(cè)試分子的分子量（µg/µmol）了解測(cè)試樣品（n）中物素的nmoles（來(lái)源于標(biāo)準(zhǔn)曲線）和測(cè)定中測(cè)試分子的nmoles（m）以計(jì)算分子上物素的數(shù)量。

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